1、离子交换剂的选择选择理想的交换剂是提高分辨率和有效成分获得率的重要前提：选择交换剂时应从如下几方面加以考虑。首先要选择对阳离子交换剂或阴离子交换剂，使被分离物质的电9荷与交换剂平衡离子的电荷正负性相同。对于两性离子，应根据其在稳定的pH范围内所带的电荷选择交换剂。其次要对强弱离子交换剂进行选择。离子交换层析中一般不用中强度的交换剂。强性离子交换剂常用于无离子水的制备和分离一些在pH时较稳定的化合物。分离生物样品习惯于弱性离子交换剂。第三要选择平衡离子。为了提高交换容量，一...

一、凝胶过滤色谱的原理及其特点1、原理：凝胶过滤层析又称凝胶排阻色谱,分子筛色谱法,凝胶过滤法等。利用凝胶过滤介质为固定相，根据物料中溶质相对分子质量的差异的液相色谱法。2、特点：（1）操作方便,条件温和,不会使物质变性；（2）色谱介质不需再生,可反复便用。（3）分离效率高，回收率较高。（4）广泛应用于生物大分子的初级分离，脱盐等。（5）分辨率较低，需采用细长柱。（6）经过凝胶过滤色谱后样品被稀释，上样前需进行浓缩。二、凝胶过滤色谱的凝胶特性参数及其具体含义(1)排阻极限(e...

一、疏水层析概述疏水层析（HIC）亦称为疏水作用层析，是利用固定相载体上偶联的疏水性配基与流动相中的一些疏水分子发生可逆性结合而进行分离的层析技术。从作用机制来看，它属于吸附层析。非极性化合物例如苯、环己烷在水中的溶解度非常小，与水混合时会形成互不相溶的两相，即非极性分子有离开水相进入非极性相的趋势，即所谓的疏水性(Hydrophobicity)。非极性溶质与水溶剂的相互作用则称为疏水效应(Hydrophobiceffect)。疏水效应疏水作用(hydrophobicinte...

分配层析法是根据一种或多种化合物，在两种不相混合的溶剂间的分配来分离物质的方法。相当于一种连续液一液萃取法。在一定温度下，物质同时溶解于两种相接触的不相混合的溶剂中，其中一种溶剂吸收在支持物上，作为固定相，另一为流动相，化合物在两相中的浓度之比是一个常数:分配系数。一、分配层析法的原理：分配柱层析所用仪器，操作过程都与一般吸附柱层析法相同，柱内装满某种粉末状物质的载体，在载体的表面上保持一种液相，这种液相并不移行，故叫固定相，将混合物样品溶液倒入柱内后再用溶剂冲洗，此溶剂移行...

1、装柱子：装柱子（添硅胶）时，有两种方法：即湿法装柱和干法装柱，二者各有优劣。不论干法还是湿法，硅胶（固定相）的上表面一定要平整，并且硅胶（固定相）的高度一般为15cm左右，太短了可能分离效果不好，太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后，再填入柱子中，然后再加压用淋洗剂“走柱子”，本法大的优点是一般柱子装的比较结实，没有气泡。干法装柱则是直接往柱子里填入硅胶，然后再轻轻敲打柱子两侧，至硅胶界面不再下降为止，然后再填入硅胶至合适高度，后...