低温冷冻干燥机在泥土抗生素测定中的应用

　　低温冷冻干燥机对泥土中抗生素测定有着重要应用，包括以下步骤：

　　1.样品制备

　　通过冷冻干燥机在低温真空环境下把土壤冷冻干燥，然后再研磨。

　　2.提取步骤

　　称取一定量冻干研磨后的样品，加15mL磷酸盐缓冲盐，用NaOH或HCl溶液调节pH至4-5后，加入同位素提取内标液;再加入20mL乙腈后，超声重复提取二次，合并提取液，旋蒸浓缩。

　　3.分离净化步骤

　　用4mL甲醇洗脱小柱两次，洗脱液收集于10mL玻璃离心管中；后将洗脱液氮吹浓缩(干浴温度为35℃)至恰好吹干，加入500yL含0.025%甲酸的甲醇/水(体积比1:1)和50ng进样内标液，涡旋混合均匀，用0.22μπι的针筒过滤器过滤后，保存于自动进样样品瓶中，作为仪器的净化试样。

　　4.分析检测步骤

　　HPLC_MS/MS测定可使用高效液相色谱仪和质谱仪测定，色谱柱为C18液相色谱柱，3.5μπι·3.0mm·150mm。电喷雾电离源，多反应监测模式，HPLC条件为进样体积10yL;柱温40℃;流动相为高纯水(含0.01%的甲酸)和乙腈，流速为0.40 111171^11;通过各目标物的保留时间、定性离子对进行定性分析;通过同位素的峰面积比值进行定量分析，得出净化试样的测定结果。