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752和722紫外可见分光光度计的使用详细说明

发布时间:2013-03-18   点击次数:2844次
 752紫外可见分光光度计

一、仪器的工作原理
分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下,产生了对光的吸收效应,物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱,因此当某单色光通过溶液时,其能量就会被吸收而减弱,光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系,也即符合于比色原理一比耳定律。
τ=I/Io
log I/Io=KCL
A= KCL
从以上公式可以看出,当入射光、吸收系数和溶液的光径长度不变时.透过的光是根据溶液的浓度而变化的,752紫外可见分光光度计的基本原理是根据上述物理光学现象而设计的。

二、752紫外可见分光光度计仪器的安装、使用安装

仪器在安装使用前应对仪器的安全性进行检查,电源电压是否正常,接地线是否牢固可靠,在得到确认后方和接通电源使用。
2 仪器经过运输和搬运等原因,会影响波长准确度,应进行仪器调校后使用。
使用:仪器使用前需开机预热30min
本仪器键盘共有4个键,分别为; 1 A /τ/C/F 
1SD
2 0
3100
4 A /τ/C/F键:每按此键来切换Aτ CF之间的值。
A——吸光度(Absorbance
T——透射比(Trans
C——浓度(conc
F——斜率(Factor
(2)F值通过按键输入(后面介绍如何设置)
5SD键:该键具有2个功能
a)用于RS232串行口和计算机传输数据(单向传输数据,仪器发向计算机)。
b)当处于F状态时,具有确认的功能,即确认当前的F值,并自动转到C,计算当前的C值(C=F*A)。
0%键:该键具有2个功能
a)调零;只有在τ状态时有效,打开样品室盖,按键后应显示0.000
b)下降键:只有在F状态时有效,按本键F值会自动减1,如果按住本键不放,目动减1会加快速度;如果F值为0后,再按键它会自动变为1999。而按键开始自动减1
7 ∆100%键;该键具有2个功能
a)只有在Aτ状态时有效,关闭样品室盖,按键后应显示0.000100.0
b)上升键:只有在F状态时有效,按本键F值会自动加1,如果按住本键不放,自动加1会加快速度,如果F值为1999后,再按键它会自动变为0,再往键开始自动加l
例如:设置斜率为1500
方法一
T)按 AτCF键切换到 F状态。
b)如果当前F值为1000,则按100%键,直到F值为1500
C)再按 SD键,表示当前的 F值为 1500,然后自动回到 C状态,假如所测的 A值为 0234,则此时显示 C值为 0351
方法二
a)按AτCF键切换到F状态。
b)如果当前的 F值为 1000,则按100%键,直到F值为 1500、再按 AτCF键切换到C状态,假如所测的A值为0.224,则此时显示C值为0351

 

722型分光光度计

一、 722型分光光度计测量原理 

分光光度法测量的理论依据是伯郎比耳定律:当容液中的物质在光的照射和激发下,产生了对光吸收的效应。但物质对光的吸收是有选择性的,各种不同的物质都有其各自的吸收光谱。所以根据定律当一束单色光通过一定浓度范围的稀有色溶液时,溶液对光的吸收程度A与溶液的浓度cg/l)或液层厚度b(cm)成正比。其定律表达式A=abc 
a是比例系数)。当c的单位为mol/l时,比例系数用ε表示,则A=εbc称为摩尔吸光系数。其单位为L•mol-1•cm-1它是有色物质在一定波长下的特征常数。 
T(透光率)=I/I0 A(吸光度)= -lgT 或 A=K•C•L(比色皿的厚度) 
测定时,入射光I, 
吸光系数和溶液的光径长度不变时,透过光是根据溶液的浓度而变化的,即“K”为常数。比色皿厚度一定,“L”“I0”也一定。只要测出A即可算出“C”  
二、
722型分光光度计 的使用 
1、将灵敏度旋钮调至“1”档(信号放大倍率小)。 
2、开启电源,指示灯亮 ,选择开关置于“T”,波长调至到测试用波长。仪器预热20分钟。 
3、打开试样室(光门自动关闭),调节透光率零点旋钮,使数字显示为000.0。(调节100%T旋钮),盖上试样室盖,将比色皿 
架处于蒸馏水校正位置,使光电管受光,调节透光率100%旋钮使数字显示100.0。如显示不到100.0,则可适当增加微电流放大的倍数。(增加灵敏度 
的档数同时应重复(3)调节仪器透光率的“0”位)但尽量使倍率置于低档使用。这样仪器会有更高的稳定性。 
4、预热后,按(3)连续几次调整透光率的“0”位和“100%”的位置,待稳定后仪器可进行测定工作。 
三、 
722型分光光度计吸光度“A”的测量 

将选择开关置于。调节吸光度调零旋钮,使得数字显示为零,然后将被测样品移入光路,显示值即为被测样品的吸光度值。 
四、 浓度c的测量 
将选择开关由“A”旋至“C”将已标定浓度的样品放入光路,调节浓度旋钮,使得数字显示为标定值,将被测样品放入光路即可读出被测样品的浓度值。 
722型分光光度计 注意事项: 
1、测量完毕,速将暗盒盖打开,关闭电源开关,将灵敏度旋钮调至低档,取出比色皿,将装有硅胶的干燥剂袋放入暗盒内,关上盖子,将比色皿中的溶液倒入烧杯中,用蒸馏水洗净后放回比色皿盒内。 
2、每台仪器所配套的比色皿不可与其它仪器上的表面皿单个调换。 
722型分光光度计 使用方法 
1)预热仪器 将选择开关置于“T”,打开电源开关,使仪器预热20分钟。为了防止光电管疲劳,不要连续光照,预热仪器时和不测定时应将试样室盖打开,使光路切断。 
2)选定波长 根据实验要求,转动波长手轮,调至所需要的单色波长。 
3)固定灵敏度档 在能使空白溶液很好地调到“100%”的情况下,尽可能采用灵敏度较低的挡,使用时,首先调到“1”挡,灵敏度不够时再逐渐升高。但换挡改变灵敏度后,须重新校正“0%”“100%”。选好的灵敏度,实验过程中不要再变动。 
4)调节T=0% 轻轻旋动“0%”旋钮,使数字显示为“00.0”,(此时试样室是打开的)。 
5)调节T=100% 将盛蒸馏水(或空白溶液,或纯溶剂)的比色皿放入比色皿座架中的*格内,并对准光路,把试样室盖子轻轻盖上,调节透过率“100%”旋钮,使数字显示正好为“100.0”。 
6)吸光度的测定 将选择开关置于“A”,盖上试样室盖子,将空白液置于光路中,调节吸光度调节旋钮,使数字显示为“.000”。将盛有待测溶液的比色皿放入比色皿座架中的其它格内,盖上试样室盖,轻轻拉动试样架拉手,使待测溶液进入光路,此时数字显示值即为该待测溶液的吸光度值。读数后,打开试样室盖,切断光路。 
重复上述测定操作1-2次,读取相应的吸光度值,取平均值。 
7)浓度的测定 选择开关由“A”旋置“C”,将已标定浓度的样品放入光路,调节浓度旋钮,使得数字显示为标定值,将被测样品放入光路,此时数字显示值即为该待测溶液的浓度值。 
8)关机 实验完毕,切断电源,将比色皿取出洗净,并将比色皿座架用软纸擦净。

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